Paralelismo en inmunoensayos: dos abordajes aplicados a la determinación de anticuerpos anti-péptido deaminado de gliadina

Resumen

Introducción: el análisis de paralelismo en un ensayo de ELISA examina si los calibradores se comportan como el analito endógeno frente a los inmunorreactantes del kit. Si la reactividad es comparable, es válida su aplicación con fines semicuantitativos en el área diagnóstica.
Objetivo: analizar el paralelismo entre dos inmunoensayos comerciales ELISA como parte de un programa de verificación operativa para determinación de anticuerpos anti - péptido deaminado de gliadina de clase IgA e IgG (PDG-A y PDG-G).
Materiales y métodos: se procesaron cuatro muestras: M1 a M4. Para el análisis del paralelismo entre 1) muestras y estándares y 2) muestras entre sí, se emplearon dos estrategias: en la primera, se ajustó un modelo logístico de 4 parámetros (4PL) a muestras y estándares para después linealizar los datos con la transformación Logit - Log. Luego, se comparó la similitud entre el coeficiente de Hill y la pendiente de las rectas por ANOVA. En el segundo enfoque, basado sobre el coeficiente de variación (CV), se analizó el paralelismo entre muestras. Usando diluciones seriadas de cada muestra, se interpolaron las densidades ópticas en la curva de calibración y se corrigió por factor de dilución: el nivel de anticuerpos obtenido debería ser consistente en el rango de diluciones explorado y no exhibir desviaciones por fuera de valores prefijados para un CV de 20 %.
Resultados: los dos abordajes fueron congruentes, M1 no reacciona de manera predecible con el kit PDG-A, mientras que M3 tampoco lo hace con el kit PDG-G.