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Presentación de estudios realizados por Electroforesis e Inmunofijación en muestras  
de suero y orina de pacientes con “Discrasia de células plasmáticas”  
CASO CLÍNICO  
Presentación de estudios realizados por Electroforesis e  
Inmunofijación en muestras de suero y orina de pacientes  
con “Discrasia de células plasmáticas”  
Santoro, S.A.  
Sector Proteínas, Laboratorio Central, H.I.G.A.Gral.San Martín. La Plata, Bs.As., Argentina.  
Contacto: Santoro S.A.; silvinasantoro@hotmail.com  
Fisiológicamente las células plasmáticas secretan un exceso de cadenas livianas que son elimi-  
RESUMEN  
nadas por riñón. En un desorden inmunoproliferativo de células plasmáticas, se sintetizan cadenas  
livianas en mayor cantidad y de naturaleza monoclonal que, al eliminarse en la orina, constituyen la  
proteinuria de tipo mielomatosa o proteinuria de Bence-Jones -Objetivo: presentar los estudios reali-  
zados en muestras de suero y orina de pacientes con “Discrasia de células plasmáticas”, por técnicas  
de Electroforesis e Inmunofijación. Se utilizaron muestras de suero fresco y alícuotas de orina de 24  
horas concentradas. Las electroforesis y las inmunofijaciones de las muestras de suero y orina con-  
centradas se realizaron en soportes de agarosa, y la cuantificación de inmunoglobulinas se realizó  
por nefelometría. Se obtuvieron las imágenes de los estudios de electroforesis de suero y orina con  
presencia de Banda Homogénea, y de inmunofijaciones de suero y orina con Componente Monoclonal  
de las muestras procesadas. En la presentación de estos estudios se evidencia que la técnica de in-  
munofijación permite confirmar y tipificar la/las Bandas Homogéneas observadas en la electroforesis.  
Palabras clave: electroforesis, inmunofijación, banda homogénea, componente monoclonal, protei-  
nuria de Bence-Jones.  
ABSTRACT  
Physiologically plasma cells secrete an excess of light chains that are eliminated by the kidney.  
In a plasma cell immunoproliferative disorder , light chains are synthesized in greater quantity and  
monoclonal nature, to be eliminated in the urine, proteinuria are myelomatoid type or Bence-Jones  
proteinuria. To show studies in serum and urine samples of patients with “plasma cell dyscrasia”  
by techniques electrophoresis and immunofixation. Samples of fresh serum and and 24 hour urine  
concentrated aliquots were employed. Electrophoresis and immunofixation of serum and concentrated  
urine were performed on agarose supports, and immunoglobulin quantitation was performed by  
nephelometry. Images of serum and urine electrophoresis with the presence of homogeneous band,  
and serum and urine immunofixations with monoclonar components were obtained of processed  
samples. In the presentation of these studies are evidence that the technique of immunofixation  
confirms and criminalize the Homogeneous bands observed in electrophoresis.  
ISSN 1515-6761 Ed. Impresa  
ISSN 2250-5903 Ed. CD-ROM  
Código Bibliográfico: RByPC  
Fecha de Recepción:  
8/09/2014  
Fecha de Aceptación:  
4/10/2014  
0
Keywords: electrophoresis, immunofixation, homogeneos strip, monoclonal component, Bence-Jones  
proteinuria.  
2
Introducción  
uroproteinograma en gel de agarosa y se confirman e identi-  
Fisiológicamente las células plasmáticas secretan un ex- fican por inmunofijación (IF). La IF es un método de gran sen-  
1
ceso de cadenas livianas que son eliminadas por riñón . En sibilidad y especificidad que permite confirmar la presencia  
un desorden inmunoproliferativo de células plasmáticas se de componente monoclonal (CM) en suero y orina, incluso las  
sintetizan cadenas livianas en mayor cantidad y de natura- ténues bandas homogéneas como así también aquellas que  
leza monoclonal que, al eliminarse en la orina, constituyen migran en movilidades atípicas o solapadas con alguna de las  
la proteinuria de tipo mielomatosa o proteinuria de Bence- múltiples bandas en la electroforesis (EF), y tipificarlas.  
2
Jones . Las cadenas libres monoclonales habitualmente se  
El objetivo de este trabajo es presentar los estudios realiza-  
1
presentan como monómeros o dímeros , pero también puede dos en muestras de suero y orina de cinco pacientes con “Dis-  
encontrárselas como multímeros. Las CLM se detectan por el crasia de células plasmáticas” a células B por técnicas de EF e IF.  
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de suero y orina de pacientes con “Discrasia de células plasmáticas”  
Materiales y métodos  
Sujeto experimental:  
g/l y albúmina de 35 g/l. En el proteinograma electroforé-  
tico se observa una Banda Homogénea (BH) de movilidad  
Muestras de suero fresco y orina de 24 hs.remitidas al lenta, que representa el 39 % de las proteínas totales (por  
laboratorio para su procesamiento, de pacientes con discra- densitometría) equivalente a 40g/l. El resultado del dosaje  
sia de células plasmáticas provenientes de diversos servi- de inmunoglobulinas por nefelometría es: IgG 4119 mg/dl,  
cios del hospital (internados y consultorio externo) y deri- IgA menor de 24 mg/dl, IgM menor de 18 mg/dl. Figura 1.  
vaciones de otros hospitales. Las muestras de orina de 24  
Se realiza IF en suero confirmando la presencia de un CM  
horas fueron concentradas en concentradores marca PRO- IgG Kappa. Figura 2.  
CHEM de acuerdo a la proteinuria de las mismas dosadas  
La orina de este paciente resulta positiva + (0,3 g/l) para  
en el sector Orinas del Laboratorio (con la técnica de Rojo de proteínas en la tira reactiva de orina (no se dosó la protei-  
Pirogalol en el autoanalizador BT 3000 plus).  
nuria total por métodos cuantitativos ni se cuantificaron las  
cadenas livianas).  
Equipamiento, reactivos y procedimiento:  
Las EF de las muestras de suero y orina concentradas se  
realizaron en soportes de agarosa en el equipo de electrofo-  
resis Microgel (INTERLAB, Italia), utilizando el kit comercial  
SEROPROTEINAS B-1/B-2. Las IF de las mismas se realizaron  
con el mismo equipamiento, utilizando el kit comercial IM-  
MUNOFIJACION N.4 VIOLETA ACIDO. La cuantificación de in-  
munoglobulinas se realizó por Nefelometría con el equipo  
IMMAGE 800 (BECKMAN COULTER,USA).  
Figura 1. Electroforesis en suero efectuado en agarosa.  
Las proteínas totales y albúmina séricas fueron dosadas  
en el sector Química del Laboratorio , con las técnicas de  
Biuret y Verde de Bromocresol respectivamente, en el au-  
toanalizador BT TARGA ( WIENER LAB- ROSARIO- ARGENTINA).  
Valores de referencia en suero:  
Para proteinas totales de 60 a 80 g/l, para albúmina de  
3
4
6 a 46 g/l, para IgG de 750 a 1600 mg/dl, para IgA de 80 a  
50 mg/dl, para IgM de 45 a 300 mg/dl, para kappa de 629  
a 1350 mg/dl y para lambda de 313 a 723 mg/dl. Tabla I.  
Valores de referencia en orina:  
Para kappa menor a 1,85 mg/dl y para lambda menor a  
mg/dl. Tabla II.  
El proteinograma señalado con la flecha roja es el pertene-  
ciente al paciente 1  
5
Resultados  
Paciente 1:  
Figura 2. Inmunofijacion en suero efectuada en  
agarosa.  
Paciente que presenta en suero proteínas totales de 98  
Tabla I. Valores de referencia en suero.  
Proteínas totales  
Albúmina  
IgG  
IgA  
IgM  
60-80 g/l  
36 – 46 g/l  
750 – 1600 mg/dl  
80 – 450 mg/dl  
45 – 300 mg/dl  
629 – 1350 mg/dl  
313 – 723 mg/dl  
KAPPA  
LAMBDA  
Tabla II. Valores de referencia en orina.  
KAPPA  
LAMBDA  
Menor de 1,85 mg/dl  
Menor de 5 mg/dl  
Inmunofijacion correspondiente al suero del paciente 1  
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de suero y orina de pacientes con “Discrasia de células plasmáticas”  
Con la orina de 24 horas concentrada se realiza un Uro- positiva). Figura 4.  
proteinograma en agarosa, cuyo resultado es: Proteinuria  
de tipo mielomatosa. Figura 3.  
Paciente 2:  
Paciente que presenta en suero proteínas totales de 65  
Se realiza también en esta muestra IF, evidenciándose  
cadenas livianas de tipo Kappa monoclonal (Bence Jones g/l y albúmina de 36 g/l. En el proteinograma electroforé-  
Figura 3. Electroforesis en orina concentrada  
Figura 5. Electroforesis en suero efectuado en agarosa.  
efectuada en agarosa.  
El proteinograma señalado con la flecha roja es el pertene-  
El uroproteinograma señalado con la flecha roja es el perte-  
ciente al paciente 2  
neciente al paciente 1  
Figura 4. Inmunofijacion en orina concentrada efec-  
tuada en agarosa.  
Figura 6. Electroforesis en orina concentrada  
efectuada en agarosa.  
Inmunofijacion correspondiente a la orina concentrada del  
paciente 1  
El uroproteinograma señalado con la flecha roja es el perte-  
neciente al paciente 2  
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tico se observan dos BH: una de movilidad gamma rápida, Paciente 3:  
que representa el 16 % de las proteínas totales (por densito- Paciente que presenta en suero proteínas totales de 104  
metría) equivalente a 10 g/l, y la otra de aproximadamente g/l y albúmina de 26 g/l. En el proteinograma electroforéti-  
% de las proteínas totales equivalente a 4 g/l con movilidad co se observa una BH de movilidad lenta que representa el  
6
solapada con la fracción Beta-2. El resultado del dosaje de  
inmunoglobulinas por nefelometría es: IgG 1290 mg/dl, IgA  
Figura 9. Electroforesis en suero efectuado en agarosa.  
17 mg/dl, IgM 37 mg/dl. Figura 5.  
La orina de este paciente posee trazas de proteínas  
(0.1g/l) en la tira reactiva de orina (no se dosó la protei-  
nuria total por métodos cuantitativos). La cuantificación de  
cadenas livianas en la misma resuta: Kappa inferior a 1.85  
mg/dl y Lambda 891 mg/dl.  
Con la orina de 24 horas concentrada se realiza un Uro-  
proteinograma en agarosa, cuyo resultado es: Proteinuria  
de tipo mielomatosa. Figura 6.  
Se realiza IF en el suero confirmando la presencia de CM  
IgG Lambda y cadenas livianas Lambda libre (correspon-  
diendo a las dos BH observadas en el proteinograma elec-  
troforético) Figura 7.  
Se realiza también IF de la muestra de orina, evidencián-  
dose cadenas livianas Lambda “ libres” monoclonal (Bence  
Jones positiva). Figura 8.  
Figura 7. Inmunofijacion en suero efectuada en  
agarosa.  
El proteinograma señalado con la flecha roja es el pertene-  
ciente al paciente 3  
Figura 10. Electroforesis en suero y orina concentrada  
efectuada en agarosa.  
Inmunofijacion correspondiente al suero del paciente 2  
Figura 8. Inmunofijacion en orina concentrada  
efectuada en agarosa.  
El proteinograma (pos.21) señalado con la flecha roja es el  
perteneciente al paciente 3  
El uroproteinograma(pos.26)señalado con la flecha roja es  
el perteneciente al paciente 3  
Inmunofijacion correspondiente a la orina concentrada del  
paciente 2  
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de suero y orina de pacientes con “Discrasia de células plasmáticas”  
48 % de las proteínas totales (por densitometría) equivalen-  
Se realiza también IF de la muestra de orina concentrada,  
te a 50 g/l. El resultado del dosaje de inmunoglobulinas por observándose identidad inmunológica tanto con el antisue-  
nefelometría es: IgG 4360 mg/dl, IgA 61 mg/dl, IgM 112 mg/ ro antiLambda total y libre, con presencia de 2 bandas en  
dl. Y de cadenas livianas: Kappa 420 mg/dl y Lambda 669 Lambda libres (posiblemente monómero y dímero) (Bence  
mg/dl. Figura 9.  
Jones positiva). Figura 12.  
La orina de este paciente tiene una proteinuria total por  
métodos cuantitativos de 0,27 g/l.  
Con la orina de 24 horas concentrada se realiza un Uro-  
proteinograma en agarosa, cuyo resultado es: Proteinuria  
de tipo mielomatosa (con presencia de dos BH). Figura 10.  
Se realiza IF en el suero confirmando la presencia de CM  
IgG Lambda.Figura 11.  
Figura 13. Electroforesis en suero efectuado en  
agarosa.  
Figura 11. Inmunofijacion en suero efectuada en agarosa.  
El proteinograma señalado con la flecha roja es el pertene-  
ciente al paciente 4  
Inmunofijacion correspondiente al suero del paciente 3  
Figura 14. Electroforesis en orina concentrada  
efectuada en agarosa.  
Figura 12. Inmunofijacion en orina concentrada  
efectuada en agarosa.  
Inmunofijacion correspondiente a la orina concentrada del El uroproteinograma señalado con la flecha roja es el perte-  
paciente 3  
neciente al paciente 4  
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Paciente 4:  
Paciente que presenta en suero proteínas totales de 160 D y E (no antisueros K y L free disponibles). Figura 15.  
g/l y albúmina de 20 g/l. En el proteinograma electroforético Se realiza también IF de la muestra de orina concentra-  
se observa una BH de movilidad rápida que representa el 62 da, observándose Inmunoglobulina completa (IgA Lambda)  
de las proteínas totales (por densitometría) equivalente + cadena liviana Lambda “libre” monoclonal. (Bence Jones  
como cadenas livianas “libres”, se prueban antisueros anti-  
%
a 100 g/l. El resultado del dosaje de inmunoglobulinas por positiva) Figura 16.  
nefelometría es: IgG 193 mg/dl, IgA 11600 mg/dl, IgM 11  
mg/dl. Figura 13.  
Paciente 5:  
Paciente que presenta en suero proteínas totales de 51  
La orina de este paciente tiene una proteinuria total  
por métodos cuantitativos de 0,87 g/l. La cuantificación de g/l y albúmina de 17 g/l. En el proteinograma electroforético  
cadenas livianas en la misma resuta: Kappa inferior a 1,85 se observa una BH de movilidad lenta que representa el 40  
mg/dl y Lambda 60.3 mg/dl.  
% de las proteínas totales (por densitometría) equivalente  
Con la orina de 24 horas concentrada se realiza un Uro-  
proteinograma en agarosa, cuyo resultado es: Proteinuria  
de tipo mielomatosa (con presencia de dos BH). Figura 14.  
Se realiza IF en el suero confirmando la presencia de CM  
IgA Lambda correspondiente a la BH observada en el protei-  
nograma y se detectan además cadenas livianas Lambda  
de movilidad postBeta-2. Para caracterizar estas últimas  
Figura 17. Electroforesis en suero y orina efectuada en  
agarosa.  
Figura 15. Inmunofijacion en suero efectuada en  
agarosa.  
El proteinograma (pos.20) señalado con la flecha roja es el  
perteneciente al paciente 5  
Inmunofijacion correspondiente al suero del paciente 4  
El uroproteinograma (pos.21)señalado con la flecha roja es  
el perteneciente al paciente 5  
Figura 16. Inmunofijacion en orina concentrada  
efectuada en agarosa.  
Figura 18. Inmunofijacion en suero y orina efectuada  
en agarosa.  
Izquierda::Inmunofijacion correspondiente al suero del pa-  
ciente 5  
Inmunofijacion correspondiente a la orina concentrada del Derecha: Inmunofijacion correspondiente a la orina concen-  
paciente 4  
trada del paciente 5  
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de suero y orina de pacientes con “Discrasia de células plasmáticas”  
a 20 g/l. El resultado del dosaje de inmunoglobulinas por 2- Gonzalez Brito G., Hernández Nieto L. Mieloma Múltiple.  
nefelometría es: IgG 2600 mg/dl, IgA 26 mg/dl, IgM 27 mg/  
dl. Y de cadenas livianas: Kappa 3190 mg/dl y Lambda 112  
mg/dl. Figura 17.  
MEDICINE. Hematología (II): 600-612.  
La orina de este paciente tiene una proteinuria total  
por métodos cuantitativos de 5,17 g/l. La cuantificación de  
cadenas livianas en la misma resuta: Kappa 463 mg/dl y  
Lambda 15 mg/dl.  
Con la orina de 24 horas se realiza un Uroproteinograma  
en agarosa, cuyo resultado es: Proteinuria de tipo glomeru-  
lar con presencia de BH en región gamma. Figura 17.  
Se realiza IF en suero confirmando la presencia de CM  
IgGKappa. Figura 18.  
Se realiza también IF de la muestra de orina, observándo-  
se Inmunoglobulina completa (IgG Kappa) + cadena liviana  
Kappa “libre” monoclonal. (Bence Jones positiva). Figura 18.  
En este trabajo se presentaron estudios realizados en  
muestras de suero y orina de cinco pacientes con “Discrasia  
de células plasmáticas”.  
El primer caso se trata de una BH IgG Kappa en suero con  
presencia de cadenas livianas monoclonales Kappa en orina.  
En el proteinograma electroforético del paciente 2, se ob-  
servan dos BH: una de movilidad gamma rápida y la otra  
con movilidad solapada con la fracción Beta-2. En la IF de  
suero se confirma la presencia de CM IgG Lambda y cadenas  
livianas Lambda libre. Y en orina presencia de cadenas livia-  
nas Lambda libre monoclonal.  
En el Uroproteinograma, del paciente 3 se observan dos  
BH. Al realizar la IF de la orina concentrada, se observa iden-  
tidad inmunológica tanto con el antisuero anti Lambda total  
y libre, con presencia de 2 bandas en Lambda libres (posi-  
blemente monómero y dímero).  
Se realiza IF en el suero del paciente 4, confirmando la  
presencia de CM IgA Lambda correspondiente a la BH obser-  
vada en el proteinograma y se detectan además cadenas  
livianas Lambda de movilidad postBeta-2. Para caracterizar  
estas últimas como cadenas livianas “libres”, se prueban  
antisueros anti-D y E (no antisueros K y L free disponibles).  
En la IF de la muestra de orina concentrada, se observa  
Inmunoglobulina completa (IgA Lambda) + cadena liviana  
Lambda “libre” monoclonal. (Bence Jones positiva )  
El resultado del Uroproteinograma del paciente 5 es pro-  
teinuria de tipo glomerular con presencia de BH en región  
gamma. Al realizar la IF se observa Inmunoglobulina comple-  
ta (IgG Kappa) + cadena liviana Kappa “libre” monoclonal.  
En todos los casos se observó que la técnica de I.F. per-  
mite confirmar, tipificar y caracterizar la/las BH observadas  
en la EF de suero (proteinograma) y orina (uroproteinogra-  
ma).  
Referencias bibliográficas  
1
- López Corral L, García Sanz R., San Miguel J.F. Aplica-  
ciones del test sérico de cadenas ligeras libres en las  
gammapatías monoclonales.Med Clín (Barc)2010;  
135(8):368-374.  
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