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Cuantificación del colesterol en glóbulos rojos de distintos tamaños. Valores obtenidos en personas con riesgo cardiovascular  
ARTÍCULO ORIGINAL  
Cuantificación del colesterol en glóbulos rojos de  
distintos tamaños. Valores obtenidos en personas con  
riesgo cardiovascular.  
Chiari J.  
Calle 154 N° 3935 1885 Plátanos, Buenos Aires, Argentina.  
Contacto: Chiari J.; josechisari@gmail.com.ar  
Resumen  
El glóbulo rojo humano es una célula incompleta. Entre los componentes mayoritarios de la bicapa lipídi-  
ca está bien establecido que el colesterol juega un papel importante en las propiedades fisicoquímicas regu-  
lando su resistencia y fluidez. La incorporación de colesterol a la membrana plasmática afecta directamen-  
te sus propiedades reológicas. El objetivo del presente trabajo es analizar la influencia del volumen celular  
al cuantificar el colesterol proveniente de la membrana plasmática de los glóbulos rojos y establecer un pa-  
rámetro independiente de medición y su relación con la población de riesgo cardiovascular y el colesterol de  
lipoproteínas de alta densidad (C-HDL). Para la determinación de colesterol en la membrana plasmática del  
glóbulo rojo, se utilizó el clásico método extractivo con alcohol éter y la posterior determinación del coleste-  
rol por el método enzimático. Los parámetros hematológicos se evaluaron en un contador hematológico y el  
C-HDL se obtuvo por precipitación selectiva con cloruro de magnesio y dextrán sulfato y posterior medición  
del colesterol en el sobrenadante. Los resultados obtenidos en los tres grupos: Control, Cardiología y Diabe-  
tes se exponen en una tabla. Para la cuantificación del colesterol en la membrana eritrocitaria se utilizaron  
dos expresiones: microgramos de colesterol por cada 10 millones de hematíes y microgramos de colesterol  
por cada 10 millones de hematíes por cada 90 fentolitros. La primera expresión mostró correlación lineal  
positiva con el volumen corpuscular medio. Ambos parámetros presentaron relación inversa con el C-HDL.  
La expresión microgramos de colesterol por cada 10 millones de hematíes es un parámetro dependiente  
del volumen corpuscular medio y como tal no puede explicar aumentos de colesterol, independientemente  
de las fluctuaciones del tamaño celular. Al incluir el volumen celular en los cálculos se obtuvo la expresión:  
microgramos de colesterol por cada 10 millones de hematíes por cada 90 fentolitros el cual es un paráme-  
tro independiente del volumen celular y se encontró aumentado en pacientes con riesgo cardiovascular  
asociado a C-HDL bajo.  
Palabras clave: colesterol, tamaño del glóbulo rojo, cardiovascular, reología.  
Abstract Human red blood cells are incomplete cells . Based on their size, they can be classified into: macrocytes,  
normocytes and microcytes. Their plasma membrane is responsible for their morphology and elasticity  
and contributes to their deformability. Their rheological properties reflect their structure. They are flexible  
to access the smallest capillaries and adapt to the blood flow, and the incorporation of cholesterol to their  
plasma membrane directly affects their rheological properties. The aims of this study were to analyze the  
influence of cell volume to quantify the cholesterol from red blood cells and to establish an independent  
measurement parameter and its relation to patients with cardiovascular risk and HDL- C. To determine  
cholesterol in the plasma membrane of red blood cells, we used the classical extraction method with  
alcohol ether and subsequent determination of cholesterol by the enzymatic method. Haematological  
parameters were determined in a haematology analyser and serum HDL-C was determined by fractional  
precipitation with magnesium chloride and dextran sulfate. The amount of cholesterol in red blood cells was  
expressed both as micrograms of cholesterol per 10 million red blood cells and as micrograms of cholesterol  
per 10 million red blood cells for every 90 fentoliters, and grouped into three groups: control, heart and  
diabetes. Both parameters showed inverse relationship with HDL-cholesterol. The parameter micrograms  
of cholesterol per 10 million red blood cells depends on the mean corpuscular volume and it cannot explain  
ISSN 1515-6761 Ed. Impresa  
increases in cholesterol, independently of variations in cell size. Including cell volume in calculations, the  
following was obtained: micrograms of cholesterol per 10 million red blood cells per every 90 femtoliter,  
which showed no correlation with cell volume and was increased in patients with high cardiovascular risk  
associated with low HDL-C levels.  
ISSN 2250-5903 Ed. CD-ROM  
Código Bibliográfico: RByPC  
Fecha de Recepción:  
1
1/12/2015  
Fecha de Aceptación:  
6/04/2016  
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Keywords : cholesterol, erythrocyte size, cardiovascular, rheological, red blood cell.  
ByPC 2016;80(2):24-27.  
Cuantificación del colesterol en glóbulos rojos de distintos tamaños. Valores obtenidos en personas con riesgo cardiovascular  
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tes de la progresión de la placa ateroesclerótica7.  
En niños con hipercolesterolemia familiar, pero sin lesión  
Introducción  
El glóbulo rojo humano maduro es una célula que no  
posee núcleo ni sistemas de endomembranas. Cada célula vascular detectable, la relación colesterol / fosfolípidos de la  
está llena de hemoglobina, proteína soluble que se une membrana plasmática del glóbulo rojo está aumentada con  
y transporta casi todo el oxígeno de la sangre. Este tipo respecto al grupo control e inversamente relacionada con el  
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de célula es lo suficientemente flexible para pasar por los C-HDL . En adolecentes obesos se determinaron cambios  
capilares más pequeños. Son incompletas, incapaces en la composición lipídica del glóbulo rojo comparados con  
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de reproducirse, sobreviven unos 120 días y su función adolecentes de peso normal .  
principal es transportar hemoglobina, la cual está disuelta  
en concentración muy alta en el citosol.  
En hipercolesterolemia, causa importante de enferme-  
dad cardíaca coronaria, la membrana plasmática del glóbulo  
La reología es la ciencia que estudia la respuesta de los rojo se ve afectada, según estudios realizados en glóbulos  
1
0
.
fluidos complejos en términos de dos parámetros principa- rojos de ratas  
les: esfuerzo y deformación(flujo). La sangre humana es  
Este trabajo tiene por objeto analizar cómo influye el vo-  
un fluído de reología muy compleja, porque la viscosidad de lumen celular al cuantificar el colesterol en glóbulos rojos,  
la sangre no es proporcional al esfuerzo aplicado, es decir obtener un parámetro de medida independiente y observar  
es un fluido no newtoniano que cuenta con características su relación frente al C-HDL sérico en pacientes con distinto  
pseudoplásticas: cuanto mayor sea el esfuerzo aplicado, riesgo cardiovascular.  
menor es su viscosidad. Ésta está determinada por la vis-  
cosidad plasmática y por la concentración celular, deforma- Materiales y Métodos  
1
ción y agregación de glóbulos rojos . La deformación de es-  
Para el desarrollo del trabajo se comenzó por la toma de  
tos glóbulos es muy importante en la microcirculación, pues muestra sanguínea de cada persona por punción venosa, se-  
deben atravesar capilares con diámetro inferior al celular. parándolas en tres grupos:  
Entre los factores que regulan la rigidez del glóbulo rojo es-  
Controles: personas que en su historial de laboratorio no  
tán: su geometría (relación superficie / volumen), viscosi- presentaban valores bajos de C-HDL y todos sus parámetros  
dad interna (función de la hemoglobina) y las propiedades metabólicos dentro del rango normal y no estaban medicados.  
1
elásticas de la membrana celular .  
Grupo cardiología: muestras sanguíneas de personas que  
Entre los componentes mayoritarios de la bicapa lipídi- ya tuvieron un episodio cardiovascular y que por su condición  
ca, está bien establecido que el colesterol juega un papel estaban medicados con hipocolesterolemiantes y en su his-  
importante en las propiedades fisicoquímicas, regulando torial de laboratorio presentaban valores C-HDL menores a 40  
su resistencia y fluidez. La incorporación de colesterol en la mg/dl.  
membrana plasmática del glóbulo rojo afecta sus propieda-  
Grupo diabetes: muestras de personas que en su historial se  
des reológicas, traduciéndose en una reducción en la defor- encontraban glucemias de más de 170 mg/dl y hemoglobina  
3
midad celular y un aumento en la fragilidad osmótica .  
glicosilada de más de 7 % y estaban medicadas con hipogluce-  
En pacientes con esclerosis múltiple, la composición de miantes.  
lípidos de la membrana plasmática del glóbulo rojo resultó  
Para determinar los parámetros hematológicos se utilizó  
alterada y parece ser que dicha alteración junto con la flui- un contador hematológico Mindray BC-3000. Se determinó el  
dez de la membrana está influenciada por el estado inflama- C-HDL por precipitación selectiva, empleando solución de clo-  
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torio . En perros con una dieta a base de colesterol y aceite ruro de magnesio / sulfato de dextran (PM 50.000) provisto por  
de coco, se observó un aumento en la relación colesterol / Wiener Lab. Para el dosaje del colesterol de la membrana del  
fosfolípidos del glóbulo rojo, con disminución de la fluidez de glóbulo rojo se tomó una alícuota de 0,2 ml sangre entera, la  
la membrana, alcanzando un máximo a las 12 semanas, en que fue lavada cuatro veces con solución fisiológica, posterior-  
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cambio el hematocrito declinó a partir de la sexta semana . mente el colesterol fue extraído con la mezcla extractante, que  
El aumento de colesterol en la membrana plasmática del contiene un tensioactivo. Luego, se agitó vigorosamente, se  
glóbulo rojo se correlaciona con el sexo, edad, presión arte- dejó reposar, y después se centrifugó obteniendo un sobrena-  
rial sistólica, diastólica, tabaquismo, hipertrigliceridemia, dante límpido del que se tomó una alícuota de 50 mililitros y se  
hiperfosfolipemia y alteraciones en el colesterol de lipopro- determinó el colesterol por reacción colorimétrica enzimática.  
6
teínas de alta densidad(C-HDL) .  
Este método presentó un CV % de 11,7 %.  
El colesterol libre es la forma predominante en la mem-  
Análisis estadístico: para las correlaciones se utilizó el coefi-  
brana plasmática del hematíe. Tanto el colesterol libre como ciente de correlación de Pearson. En todos los casos los valores  
el esterificado se incrementa en pacientes con angina esta- presentados corresponden a la media aritmética ± error es-  
ble crónica, en comparación con los que presentan síndro- tándar de la media. Las diferencias estadísticas entre las me-  
me coronario agudo. Estos hallazgos sugieren que la canti- dias de las poblaciones de interés fueron analizadas mediante  
dad de colesterol en la membrana plasmática del hematíe análisis de varianza paramétrico (ANOVA) y no paramétrico  
es más importante que el tipo de colesterol presente en la (Kruskal-Wallis); un valor p < 0,05 fue considerado significati-  
membrana del eritrocito, lo que sería uno de los determinan- vamente diferente.  
ByPC 2016;80(2):24-27.  
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Resultados  
alimentación, fitoesteroles, que pueden incorporarse a la  
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Los resultados se exponen en la tabla I. Las columnas membrana plasmática o por el uso de estatinas . En cuan-  
muestran los tres grupos: Control, Cardiología, y Diabetes. to a la aplicación COL / VCM - 90 como parámetro de riesgo  
Mientras que las filas expresan: hematocrito en % (v / v), cardiovascular, el aumento de colesterol en la membrana  
recuento de glóbulos rojos en millones por milímetro cúbi- plasmática del glóbulo rojos afecta sus propiedades reoló-  
3
co, volumen corpuscular medio en fl, las absorbancias del gicas y la alteración de la reología sanguínea está conside-  
1
2
método de cuantificación de colesterol en glóbulos rojos, rada como factor de riesgo cardiovascular . Este paráme-  
el C- HDL en mg/dl, microgramos de colesterol por cada 10 tro coincidió con valores elevados en muestras con riesgo  
millones de glóbulos rojos (Col. Glo. Ro), microgramos de co- cardiovascular, aun cuando han mejorado su valor de C- HDL  
lesterol por cada 10 millones de glóbulos rojos por cada 90 e independientemente de las fluctuaciones del tamaño ce-  
fl (COL / VCM - 90).  
lular.  
En conclusión, existe relación inversa entre el colesterol  
Se observó, en general, una relación inversa entre el  
colesterol en la membrana plasmática del glóbulo rojo y el en la membrana plasmática del glóbulo rojo y el C- HDL. La  
C-HDL(r =-0,27, p < 0,05). Además, el coeficiente de corre- expresión Col.Glo.Ro es un parámetro dependiente del volu-  
lación entre Col. Glo. Ro y el volumen corpuscular medio fue men corpuscular medio y, como tal, no puede explicar los  
0
,169(p < 0,05).  
Por otra parte, el colesterol en glóbulos rojos (COL / VCM- ciones en el tamaño celular.  
0) expresados en microgramos de colesterol cada 10 mi-  
Al incluir el volumen celular en los cálculos se obtuvo la  
aumentos de colesterol independientemente de las fluctua-  
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llones de glóbulos rojos por cada 90 fl muestra diferencias expresión COL / VCM - 90, el cual es un parámetro indepen-  
significativas al comparar los grupos de riesgo (Cardiología diente del volumen celular. Este parámetro se encontró au-  
y Diabetes) con el grupo Control (p < 0,05).  
mentado en pacientes con riesgo cardiovascular asociado  
a bajo HDL.  
Discusión  
Distintos autores han demostrado aumento de coleste- REFERENCIA BIBLIOGRÁFICAS  
rol en la membrana del glóbulo rojo por distintas patologías: 1. Chien, Shu. Physiological and pathophysiological  
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edad, sexo y pacientes con padres con antecedentes car- 2. Gennaro AM, Luquita A, Rasia M. Comparison between  
6
8
diovasculares . En estas patologías es habitual encontrar  
alteraciones en el tamaño celular. Estos autores no explica-  
ron si dichos aumentos del colesterol en la membrana eri-  
trocitaria se deben al aumento en el tamaño celular.  
internal microviscosity of low-density erythrocytes  
and the microviscosity of hemoglobin solutions: an  
electron paramagnetic resonance study. Biophys J.  
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En este trabajo se discutió y se comprobó la importancia 3. Dumas D, Didelon J, Humbert JC, Gigout T, Valverde JR,  
de definir un parámetro independiente, que no guarde rela-  
ción lineal con el volumen corpuscular medio, ya que uno de  
los factores de aumento del tamaño células es el cardiovas-  
cular.  
El glóbulo rojo maduro es incapaz de sintetizar lípidos,  
por tanto una variación de lípidos en su membrana debe ser  
por el intercambio de colesterol con el plasma y su concen-  
Rasia RJ, Stoltz JF. Influencia del colesterol en membrana  
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tración en la membrana plasmática puede disminuir por la 5. Cooper RA, Leslie MH, Knight D, Detweiler DK. Red cell  
Tabla I. Parámetros evaluados.  
Grupo Control (N=92) Grupo Cardiología (N=16 ) Grupo Diabetes(N=17)  
p
Hematocrito (%)  
41,2 ± 0,02  
4,51 ± 0.02  
90,9 ± 0,2  
56,71 ± 0.5  
40,2 ± 0,05  
4,61 ± 0.025  
91,9 ± 0.1  
40,2 ± 0,05  
4,70 ± 0.03  
84,3 ± 0,1  
46,8 ± 0,12  
NS  
NS  
NS  
NS  
6
Glóbulos rojos (x 10 / mm3)  
V C M (fl.)  
C-HDL (mg/dl)  
51,5 ± 0,12  
Colesterol de glóbulos rojos  
1
1
,73 ± 0,01  
,72 ± 0,01  
2,03 ± 0,01  
1,99 ± 0,01  
1,80 ± 0,01  
1,93 ± 0,01  
NS  
7
(µg / 10 )  
7
Colesterol / VCM-90 (µg / 10  
0,002  
/
90 fl)  
VCM, volumen corpuscular medio; C-HDL, colesterol de las lipoproteínas de alta densidad; NS, no significativo. colesterol.  
ByPC 2016;80(2):24-27.  
Cuantificación del colesterol en glóbulos rojos de distintos tamaños. Valores obtenidos en personas con riesgo cardiovascular  
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